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Diaz Perales, AraceliAutor o Coautor

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9 de junio de 2019
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Artículo

Purification and Characterization of AsES Protein A SUBTILISIN SECRETED BY ACREMONIUM STRICTUM IS A NOVEL PLANT DEFENSE ELICITOR

Publicado en: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY. 288 (20): 14098-14113 - 2013-05-17 288(20), DOI: 10.1074/jbc.M112.429423

Autores:

Chalfoun, NR; Grellet-Bournonville, CF; Martínez-Zamora, MG; Díaz-Perales, A; Castagnaro, AP; Díaz-Ricci, JC
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Afiliaciones

Estn Expt Agroind Obispo Colombres, Secc Biotecnol, Las Talitas - Autor o Coautor
Univ Nacl Tucuman, Fac Bioquim Quim & Farm, Consejo Nacl Invest Cient & Tecn, RA-4000 San Miguel De Tucuman - Autor o Coautor
Univ Politecn Madrid, Escuela Tecn Super Ingenieros Agronomos, Dept Biotecnol, Unidad Quim & Bioquim - Autor o Coautor
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Resumen

In this work, the purification and characterization of an extracellular elicitor protein, designated AsES, produced by an avirulent isolate of the strawberry pathogen Acremonium strictum, are reported. The defense eliciting activity present in culture filtrates was recovered and purified by ultrafiltration (cutoff, 30 kDa), anionic exchange (Q-Sepharose, pH 7.5), and hydrophobic interaction (phenyl-Sepharose) chromatographies. Two-dimensional SDS-PAGE of the purified active fraction revealed a single spot of 34 kDa and pI 8.8. HPLC (C2/C18) and MS/MS analysis confirmed purification to homogeneity. Foliar spray with AsES provided a total systemic protection against anthracnose disease in strawberry, accompanied by the expression of defense-related genes (i.e. PR1 and Chi2-1). Accumulation of reactive oxygen species (e.g. H2O2 and O-2(radical anion)) and callose was also observed in Arabidopsis. By using degenerate primers designed from the partial amino acid sequences and rapid amplification reactions of cDNA ends, the complete AsES-coding cDNA of 1167 nucleotides was obtained. The deduced amino acid sequence showed significant identity with fungal serine proteinases of the subtilisin family, indicating that AsES is synthesized as a larger precursor containing a 15-residue secretory signal peptide and a 90-residue peptidase inhibitor I9 domain in addition to the 283-residue mature protein. AsES exhibited proteolytic activity in vitro, and its resistance eliciting activity was eliminated when inhibited with PMSF, suggesting that its proteolytic activity is required to induce the defense response. This is, to our knowledge, the first report of a fungal subtilisin that shows eliciting activity in plants. This finding could contribute to develop disease biocontrol strategies in plants by activating its innate immunity.
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Palabras clave

acremonium strictumelicitorfragaria x ananassamass spectrometry (ms)plant defenseprotein purificationprotein sequenceserine proteasesubtilisinAcremoniumAcremonium strictumAmino acid sequenceArabidopsisAvirulent strainBase sequenceBiological assayCdna sequencingChromatography, high pressure liquidCloning, molecularDisease resistanceDna, complementaryElectrophoresis, polyacrylamide gelElicitorEscherichia-coliFragariaFragaria x ananassaFungal effector proteinsFungal proteinsHypersensitive responseMass spectrometryMass spectrometry (ms)Mass-spectrometryMolecular sequence dataNucleotide-sequencesPathogenPlant defensePlant diseasesPlant immunityProtein purificationProtein sequenceReactive oxygen speciesResistanceSequence analysis, dnaSerine proteaseSerine proteasesSpectrometry, mass, matrix-assisted laser desorption-ionizationStrawberrySubtilisinSubtilisinsTrypsinUltrafiltration

Indicios de calidad

Impacto bibliométrico. Análisis de la aportación y canal de difusión

El trabajo ha sido publicado en la revista JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY debido a la progresión y el buen impacto que ha alcanzado en los últimos años, según la agencia WoS (JCR), se ha convertido en una referencia en su campo. En el año de publicación del trabajo, 2013, se encontraba en la posición 65/291, consiguiendo con ello situarse como revista Q1 (Primer Cuartil), en la categoría Biochemistry & Molecular Biology.

Desde una perspectiva relativa, y atendiendo al indicador del impacto normalizado calculado a partir de las Citas Mundiales de Scopus Elsevier, arroja un valor para la media Ponderada del Impacto Normalizado de la agencia Scopus: 1.11, lo que indica que, de manera comparada con trabajos en la misma disciplina y en el mismo año de publicación, lo ubica como trabajo citado por encima de la media. (fuente consultada: ESI 13 Nov 2025)

De manera concreta y atendiendo a las diferentes agencias de indexación, el trabajo ha acumulado, hasta la fecha 2026-04-24, el siguiente número de citas:

  • WoS: 45
  • Scopus: 47
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Impacto y visibilidad social

Desde la dimensión de Influencia o adopción social, y tomando como base las métricas asociadas a las menciones e interacciones proporcionadas por agencias especializadas en el cálculo de las denominadas “Métricas Alternativas o Sociales”, podemos destacar a fecha 2026-04-24:

  • El uso, desde el ámbito académico evidenciado por el indicador de la agencia Altmetric referido como agregaciones realizadas por el gestor bibliográfico personal Mendeley, nos da un total de: 57.
  • La utilización de esta aportación en marcadores, bifurcaciones de código, añadidos a listas de favoritos para una lectura recurrente, así como visualizaciones generales, indica que alguien está usando la publicación como base de su trabajo actual. Esto puede ser un indicador destacado de futuras citas más formales y académicas. Tal afirmación es avalada por el resultado del indicador “Capture” que arroja un total de: 64 (PlumX).

Con una intencionalidad más de divulgación y orientada a audiencias más generales podemos observar otras puntuaciones más globales como:

  • El Score total de Altmetric: 10.
  • El número de menciones en la red social X (antes Twitter): 1 (Altmetric).
  • El número de menciones en Wikipedia: 2 (Altmetric).

Es fundamental presentar evidencias que respalden la plena alineación con los principios y directrices institucionales en torno a la Ciencia Abierta y la Conservación y Difusión del Patrimonio Intelectual. Un claro ejemplo de ello es:

  • El trabajo se ha enviado a una revista cuya política editorial permite la publicación en abierto Open Access.
  • Asignación de un Handle/URN como identificador dentro del Depósito en el Repositorio Institucional: https://oa.upm.es/26288/

Como resultado de la publicación del trabajo en el repositorio institucional, se han obtenido datos estadísticos de uso que reflejan su impacto. En términos de difusión, podemos afirmar que, hasta la fecha

  • Visualizaciones: 403
  • Descargas: 228
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Análisis de liderazgo de los autores institucionales

Este trabajo se ha realizado con colaboración internacional, concretamente con investigadores de: Argentina.

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Reconocimientos ligados al ítem

This work was supported in part by Consejo de Investigaciones de la Universidad Nacional de Tucuman Grant 26/D423 and Agencia Nacional de Promocion Cientifica y Tecnologica Grant BID PICT-2008-2105.
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