Vacuolar targeting of recombinant antibodies in Nicotiana benthamiana
Publicat a:Plant Biotechnology Journal. 14 (12): 2265-2275 - 2016-01-01 14(12), DOI: 10.1111/pbi.12580
Autors: Ocampo CG; Lareu JF; Marin Viegas VS; Mangano S; Loos A; Steinkellner H; Petruccelli S
Afiliacions
Resum
Plant-based platforms are extensively used for the expression of recombinant proteins, including monoclonal antibodies. However, to harness the approach effectively and leverage it to its full potential, a better understanding of intracellular processes that affect protein properties is required. In this work, we examined vacuolar (vac) targeting and deposition of the monoclonal antibody (Ab) 14D9 in Nicotiana benthamiana leaves. Two distinct vacuolar targeting signals (KISIA and NIFRGF) were C-terminal fused to the heavy chain of 14D9 (vac-Abs) and compared with secreted and ER-retained variants (sec-Ab, ER-Ab, respectively). Accumulation of ER- and vac-Abs was 10- to 15-fold higher than sec-Ab. N-glycan profiling revealed the predominant presence of plant typical complex fucosylated and xylosylated GnGnXF structures on sec-Ab while vac-Abs carried mainly oligomannosidic (Man 7-9) next to GnGnXF forms. Paucimannosidic glycans (commonly assigned as typical vacuolar) were not detected. Confocal microscopy analysis using RFP fusions showed that sec-Ab-RFP localized in the apoplast while vac-Abs-RFP were exclusively detected in the central vacuole. The data suggest that vac-Abs reached the vacuole by two different pathways: direct transport from the ER bypassing the Golgi (Ab molecules containing Man structures) and trafficking through the Golgi (for Ab molecules containing complex N-glycans). Importantly, vac-Abs were correctly assembled and functionally active. Collectively, we show that the central vacuole is an appropriate compartment for the efficient production of Abs with appropriate post-translational modifications, but also point to a reconsideration of current concepts in plant glycan processing. © 2016 The Authors. Plant Biotechnology Journal published by Society for Experimental Biology and The Association of Applied Biologists and John Wiley & Sons Ltd.
Paraules clau
Indicis de qualitat
Impacte bibliomètric. Anàlisi de la contribució i canal de difusió
El treball ha estat publicat a la revista Plant Biotechnology Journal a causa de la seva progressió i el bon impacte que ha aconseguit en els últims anys, segons l'agència WoS (JCR), s'ha convertit en una referència en el seu camp. A l'any de publicació del treball, 2016, es trobava a la posició 7/212, aconseguint així situar-se com a revista Q1 (Primer Cuartil), en la categoria Plant Sciences.
Des d'una perspectiva relativa, i atenent a l'indicador de impacte normalitzat calculat a partir de les Citacions Mundials de Scopus Elsevier, proporciona un valor per a la mitjana Ponderada de l'Impacte Normalitzat de l'agència Scopus: 1.16, el que indica que, comparat amb treballs en la mateixa disciplina i en el mateix any de publicació, el situa com un treball citat per sobre de la mitjana. (font consultada: ESI 14 Nov 2024)
Aquesta informació es reforça amb altres indicadors del mateix tipus, que encara que dinàmics en el temps i dependents del conjunt de citacions mitjanes mundials en el moment del seu càlcul, coincideixen a posicionar en algun moment el treball, entre el 50% més citats dins de la seva temàtica:
- Field Citation Ratio (FCR) de la font Dimensions: 2.6 (font consultada: Dimensions Jun 2025)
Concretament, i atenent a les diferents agències d'indexació, aquest treball ha acumulat, fins a la data 2025-06-13, el següent nombre de cites:
- Scopus: 26
- Google Scholar: 20
- OpenCitations: 22