Vacuolar targeting of recombinant antibodies in Nicotiana benthamiana
Publicado en:Plant Biotechnology Journal. 14 (12): 2265-2275 - 2016-01-01 14(12), DOI: 10.1111/pbi.12580
Autores: Ocampo CG; Lareu JF; Marin Viegas VS; Mangano S; Loos A; Steinkellner H; Petruccelli S
Afiliaciones
Resumen
Plant-based platforms are extensively used for the expression of recombinant proteins, including monoclonal antibodies. However, to harness the approach effectively and leverage it to its full potential, a better understanding of intracellular processes that affect protein properties is required. In this work, we examined vacuolar (vac) targeting and deposition of the monoclonal antibody (Ab) 14D9 in Nicotiana benthamiana leaves. Two distinct vacuolar targeting signals (KISIA and NIFRGF) were C-terminal fused to the heavy chain of 14D9 (vac-Abs) and compared with secreted and ER-retained variants (sec-Ab, ER-Ab, respectively). Accumulation of ER- and vac-Abs was 10- to 15-fold higher than sec-Ab. N-glycan profiling revealed the predominant presence of plant typical complex fucosylated and xylosylated GnGnXF structures on sec-Ab while vac-Abs carried mainly oligomannosidic (Man 7-9) next to GnGnXF forms. Paucimannosidic glycans (commonly assigned as typical vacuolar) were not detected. Confocal microscopy analysis using RFP fusions showed that sec-Ab-RFP localized in the apoplast while vac-Abs-RFP were exclusively detected in the central vacuole. The data suggest that vac-Abs reached the vacuole by two different pathways: direct transport from the ER bypassing the Golgi (Ab molecules containing Man structures) and trafficking through the Golgi (for Ab molecules containing complex N-glycans). Importantly, vac-Abs were correctly assembled and functionally active. Collectively, we show that the central vacuole is an appropriate compartment for the efficient production of Abs with appropriate post-translational modifications, but also point to a reconsideration of current concepts in plant glycan processing. © 2016 The Authors. Plant Biotechnology Journal published by Society for Experimental Biology and The Association of Applied Biologists and John Wiley & Sons Ltd.
Palabras clave
Indicios de calidad
Impacto bibliométrico. Análisis de la aportación y canal de difusión
El trabajo ha sido publicado en la revista Plant Biotechnology Journal debido a la progresión y el buen impacto que ha alcanzado en los últimos años, según la agencia WoS (JCR), se ha convertido en una referencia en su campo. En el año de publicación del trabajo, 2016, se encontraba en la posición 7/212, consiguiendo con ello situarse como revista Q1 (Primer Cuartil), en la categoría Plant Sciences.
Desde una perspectiva relativa, y atendiendo al indicador del impacto normalizado calculado a partir de las Citas Mundiales de Scopus Elsevier, arroja un valor para la media Ponderada del Impacto Normalizado de la agencia Scopus: 1.11, lo que indica que, de manera comparada con trabajos en la misma disciplina y en el mismo año de publicación, lo ubica como trabajo citado por encima de la media. (fuente consultada: ESI 14 Nov 2024)
Esta información viene reforzada por otros indicadores del mismo tipo, que aunque dinámicos en el tiempo y dependientes del conjunto de citaciones medias mundiales en el momento de su cálculo, coinciden en posicionar en algún momento al trabajo, entre el 50% más citados dentro de su temática:
- Field Citation Ratio (FCR) de la fuente Dimensions: 2.61 (fuente consultada: Dimensions May 2025)
De manera concreta y atendiendo a las diferentes agencias de indexación, el trabajo ha acumulado, hasta la fecha 2025-05-23, el siguiente número de citas:
- Scopus: 25
- Google Scholar: 20
- OpenCitations: 22